什么是凝胶成像仪?(凝胶文档系统)
实验室凝胶成像仪研究实验室使用凝胶文件系统对凝胶电泳分离的核酸样本进行可视化和照片记录,计数微生物菌落,在蛋白质印迹上分离蛋白质样本,并通过薄层色谱(TLC)鉴定混合物。
GEL成像仪或凝胶文档系统如何工作?
凝胶成像仪或凝胶文档包含一个紫外线(UV)或可见(蓝色或白色)透照器,一个遮光罩来阻挡外部光源对样品的照射,以及一个用于图像捕捉的高分辨率相机。
凝胶成像过程
将装载到琼脂糖凝胶,培养皿或TLC膜上的样品置于过霉菌表面上。在关闭门口以防止操作员暴露于UV光之后,灯通电,并通过CCD或CMOS相机进行样本。图像保存到板载软件系统中,以便于检索或导出到Microsoft Excel或Lims。
凝胶成像仪在哪里使用?
在分子生物学、基因组学、蛋白质组学和微生物学实验室中常见的凝胶成像系统支持PCR片段鉴定、DNA定量、细菌细胞培养、环境样品测试和蛋白质分离。
B -凝胶成像仪的用途和应用
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B1 - DNA凝胶
核酸(DNA或RNA)样品被加载到琼脂糖或丙烯酰胺凝胶上,并暴露在电场中,使带负电荷的样品沿着凝胶向正极移动。较小的DNA或RNA片段比较长的片段移动得更快,这使得研究人员能够识别带有荧光染料标记的片段,从而提取样本进行进一步的纯化。DNA凝胶通常用于PCR分析、克隆和下一代测序。
B2 -蛋白凝胶
蛋白质样品被装载到聚丙烯酰胺凝胶中浸没在商业可用的缓冲液Tris-Glycene或Tris-Acetate - Tris-Glycene或Tris-Acetate -用于分离和纯化。与DNA凝胶类似,不同长度的蛋白质片段在凝胶基质中以不同的速度移动。蛋白质凝胶用于质谱分析、样品变性和印迹。
B3 - 殖民地计数
菌落计数是在装有细胞培养基的培养皿中,确定在最佳生长条件下存在的微生物菌落形成单位(cfu)数量的过程。
什么是蚁群形成单位?
每个菌落形成单元代表在板上生长的均匀活性细胞的数量的总估计。菌落计数用于检测和量化土壤,水或食物样品的微生物,以及鉴定微生物细胞培养研究的独特细胞系。
B4 -薄层色谱
薄层色谱法TLC (TLC)是一种研究技术,用于使用惰性衬底支撑的薄膜分离混合物的组分。当混合物通过色谱柱或固定相时,其组分会根据它们与色谱柱或溶剂(流动相)的亲和性以不同的速度迁移。常用的固定相包括硅胶、纤维素和氧化铝。常见的流动相有甲醇、乙酸和乙酸乙酯。TLC用于定量和鉴定许多物质,包括脂类、碳水化合物、脂肪酸和农药。
B5 - Southern and Western Blot Gel
免疫印迹凝胶,用于分离蛋白质进一步分离和纯化,主要有两种形式:天然凝胶和SDS-PAGE凝胶。天然凝胶,用于研究酶或蛋白质复合物,根据大小和离子电荷分离蛋白质。SDS- page凝胶,用于研究抗体亲和力,通过使用洗涤剂十二烷基硫酸钠(SDS)变性样品,根据大小分离蛋白质。
南部吸水凝胶用于使用限制酶消化分离来自血液或组织样品的DNA片段,分为两个主要形式:聚丙烯酰胺(PAGE)凝胶与尿素和十二烷基硫酸钠(SDS)凝胶与尿素。
E -特殊凝胶成像功能
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E1 - 积分打印机
虽然大多数商业上可用的凝胶成像系统提供可选的外部打印机。
分析耶拿的UVP PhotoDoc-It系统包括一个集成打印机,方便打印高质量的凝胶图像。
E2 -侧检修门
德国耶拿分析仪器公司的GelStudio,戈尔托和MultiDoc-It成像装置包括侧面检修门,便于装载和卸载凝胶或培养板。
E3 - PLC触摸屏凝胶成像仪
德国耶拿分析仪器公司的ChemStudio,GelStudio和戈尔托成像仪包括用于过滤器和照明控制的集成彩色触摸屏。在板载软件系统中,模板和宏是可编程支持自定义工作流程的可编程。
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